一、技术介绍

免疫共沉淀（Co-IP）作为蛋白质互作研究的黄金标准技术，依托抗原 - 抗体特异性结合与 Protein G/A 磁珠高效捕获特性，实现对细胞内天然蛋白复合物的精准富集。区别于传统 IP 技术，Co-IP 可在保留蛋白天然构象的条件下，同步捕获目标蛋白（抗原）及其生理互作蛋白，适用于解析动态互作网络、鉴定复合物组分及检测翻译后修饰（如泛素化、磷酸化）。我们的技术服务覆盖从样本制备到多维数据分析的全流程，为基础科研与药物研发提供可靠的互作验证解决方案

二、标准化服务流程

1. 样本预处理

（1）样本类型：支持哺乳动物细胞（贴壁 / 悬浮）、原代组织、体液等生物样本

（2）质量控制：通过蛋白浓度测定（BCA 法）与完整性评估（SDS-PAGE）确保样本活性

（3）定制处理：针对难裂解样本（如肿瘤组织）优化裂解方案，采用含蛋白酶 / 磷酸酶抑制剂的温和裂解液

2. 免疫捕获体系构建

（1）抗体选择：提供内源性抗体（针对目标蛋白）或标签抗体（如 His/Flag/Myc 标签）两种策略

（2）孵育条件：4℃过夜轻柔振荡孵育，最大限度保留弱互作蛋白

（3）磁珠耦合：使用高亲和力 Protein G/A 磁珠（粒径均一性 < 5%），实现抗体 - 蛋白复合物的高效捕获

3. 特异性纯化与洗涤

（1）磁场分离：采用梯度磁场分离技术，单次分离效率 > 95%

（2）严格洗涤：3 次高盐缓冲液（1M NaCl）+ 2 次低盐缓冲液（0.1M NaCl）洗涤，去除非特异性结合蛋白

4. 产物分析

三、技术优势

1. 三大核心技术保障

• （1）生理相关性：全程低温操作（4℃）+ 非变性裂解条件，保留蛋白天然互作状态

• （2）特异性富集：双重验证体系（阴性对照 IgG + 阳性对照已知互作抗体），背景信号降低 60% 以上

• （3）灵敏度升级：纳米级磁珠表面修饰技术，可捕获低丰度蛋白（检测下限 < 100pg/mL）

2. 全链条服务优势

• （1）一站式解决方案：涵盖载体构建（标签蛋白重组表达）→ 稳定细胞系筛选 → Co-IP 检测全流程

• （2）数据深度解析：提供互作蛋白 GO 功能分类、KEGG 通路富集及 PPI 网络建模（可选生物信息学分析）

• （3）质量管控体系：每批次实验配置空白对照、阳性对照，数据重复性达 ISO 17025 标准

四、服务承诺

• （1）交付周期：基础检测（WB 分析）7 个工作日，质谱鉴定 15 个工作日

• （2）报告内容：实验原始数据（胶片 / 质谱峰图）、数据分析报告（统计图表 + 结果解读）

• （3）保密协议：签订严格保密合同，保障客户知识产权

如需针对特定研究方向（如植物蛋白互作、膜蛋白检测）定制实验方案，或了解更多技术细节，欢迎随时联系我们的技术支持团队。我们将根据您的样本特性与研究目标，提供最优化的 Co-IP 技术解决方案。