Anti-CLDN紧密连接核心蛋白CLDN-1抗体

产品编号	nrbe-12343A
产品类型	小鼠单克隆抗体
英文名称	Anti CLDN-1monoclonal antibody
中文名称	紧密连接核心蛋白CLDN-1单克隆抗体
英文别名	紧密连接（TJ）核心蛋白蛋白 Claudin-1、SEMP1
产品应用	ELISA=1：500-5000，WB=1：1000-5000，IF=1:100-500Optimal working dilutions must be determined by the end user.Not yet tested in other applications.
交叉反应	Human，Mouse
抗体来源	Mouse
免疫原	Recombinant Human CLDN-1 protein
性状	Liquid
纯化方法	affinity purified by Protein A
浓度	1mg/ml
储存液	0.01M PBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件	Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
注意事项	This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
背景资料	CLDN-1（别名 Claudin-1、衰老相关上皮膜蛋白 1，缩写 CLDN1，Uniprot 编号 O95832）是紧密连接蛋白（Claudin）家族成员，为分子量约 24 kDa 的四次跨膜蛋白，其结构域决定了功能多样性：4 个疏水跨膜螺旋（TM1-TM4）构成膜锚定骨架，细胞外环 ECL1 含保守半胱氨酸残基（Cys53/Cys66），通过二硫键维持构象，53-80 位氨基酸序列是紧密连接组装关键域，ECL2 参与细胞间相互作用并调控屏障通透性；胞内 N 端参与寡聚化，C 端含 PDZ 结合基序（-S/T-X-V），可结合 ZO-1 等支架蛋白，偶联信号传导与结构支撑。作为紧密连接核心组件，其核心功能是维持上皮 / 内皮屏障完整性，调控细胞旁物质转运，参与组织微环境稳态维持，在胚胎上皮分化中通过时空表达调控发育，在免疫中调节免疫细胞跨内皮迁移。其异常表达具重要科研价值：纤维化模型中构象异常的非连接型 njCLDN-1 可激活 SRC/MAPK 通路促进基质沉积，肿瘤模型中缺失会破坏上皮完整性，诱导上皮 - 间质转化增强迁移能力，是解析组织屏障功能与细胞表型转换的关键分子，也是细胞生物学与疾病机制研究的重要靶点。
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        Anti-CLDN1 抗体是一类针对CLDN1 蛋白（Claudin-1， Claudin 1）的特异性抗体，在细胞生物学、病理学及临床研究中被广泛用于紧密连接（Tight Junction）功能、上皮 / 内皮屏障完整性及相关疾病机制的研究。

一、CLDN1 蛋白的核心功能与生物学意义

CLDN1 是Claudin 家族（ Claudins ）的重要成员，该家族包含至少 27 个成员，是构成上皮细胞和内皮细胞间紧密连接的关键跨膜蛋白，其核心功能是维持细胞极性、调控屏障通透性及细胞间信号传递：

1. 结构特点

• 属于四次跨膜蛋白，包含 4 个疏水跨膜结构域、2 个胞外环（ extracellular loop，ECL1 和 ECL2 ）、1 个胞内环及胞质内的氨基端和羧基端。

• 胞外环（尤其是 ECL1）通过保守的氨基酸序列（如半胱氨酸残基）与相邻细胞的 Claudin 蛋白或其他紧密连接分子（如 Occludin、JAM）相互作用，形成密封细胞间隙的 “拉链样” 结构。

• 羧基端可与胞质内的连接蛋白（如 ZO-1、ZO-2）结合，锚定到细胞骨架（ actin ），稳定紧密连接结构。

2. 核心功能

• 维持屏障功能：通过调控离子（如 Na⁺、Cl⁻）和小分子物质（如水、营养物质）的跨上皮 / 内皮转运，维持组织的通透性屏障（如皮肤表皮屏障、肠道黏膜屏障、血脑屏障）。例如，CLDN1 在皮肤角质形成细胞中高表达，是表皮屏障完整性的关键保障。

• 参与细胞极性建立：通过与其他紧密连接分子协同，划分上皮细胞的顶端（ apical ）和基底侧（ basolateral ）膜结构，确保细胞功能的方向性（如肠道上皮细胞的吸收与分泌功能分区）。

• 信号转导作用：胞质端可通过与信号分子（如 MAPK、NF-κB 通路相关蛋白）相互作用，参与细胞增殖、分化、凋亡的调控（如在肿瘤中，CLDN1 异常表达可能通过激活下游信号促进细胞侵袭）。

二、Anti-CLDN1 抗体的特性

Anti-CLDN1 抗体的设计基于 CLDN1 蛋白的氨基酸序列（尤其是胞外环或胞质端的特异性表位），其特性直接影响实验的准确性：

1. 特异性

需能精准识别 CLDN1，避免与 Claudin 家族其他成员（如 CLDN3、CLDN4，因家族成员同源性较高，尤其是跨膜区）交叉反应。优质抗体需通过实验验证（如在 CLDN1 敲除细胞中无信号）。

2. 类型与形式

• 单克隆抗体：由单一 B 细胞克隆产生，特异性高、批次稳定性好，适合定量分析（如 Western blot 定量）或精确的定位研究（如免疫荧光中区分 CLDN1 与其他 Claudin 的分布）。

• 多克隆抗体：可识别多个抗原表位，灵敏度较高，适合检测低丰度 CLDN1 蛋白（如某些内皮细胞样本）。

• 宿主与标记：常见宿主为兔、鼠，抗体形式包括未标记抗体（用于 Western blot、IP 等）或荧光（如 FITC、Cy3）、酶（如 HRP）标记抗体（直接用于免疫组化、流式细胞术等）。

3. 验证要求

• Western blot：能检测到预期分子量（约 22-24 kDa）的特异性条带，且在 CLDN1 过表达细胞中条带增强，敲除样本中无条带。

• 免疫组化（IHC）：在组织中定位 CLDN1 的表达（如皮肤表皮的基底层至颗粒层、肠道上皮细胞的顶端膜），且信号分布与紧密连接位置一致。

• 免疫荧光（IF）：在细胞间接触部位（如上皮细胞边缘）呈现线性或点状荧光，与 ZO-1 等紧密连接标记共定位。

三、Anti-CLDN1 抗体的主要应用场景

Anti-CLDN1 抗体是研究紧密连接功能及相关疾病的核心工具，其应用覆盖基础研究与临床转化：

1. 基础生物学研究

• 紧密连接结构与功能分析：

• 通过 IF 或 IHC 观察 CLDN1 在不同组织（如皮肤、肠道、肾脏）中的分布，结合其他紧密连接分子（如 Occludin、ZO-1）的共定位，分析屏障结构的完整性。

• 利用 Western blot 检测 CLDN1 的表达变化，研究其在细胞分化（如角质形成细胞分化）、胚胎发育（如上皮组织形成）中的作用。

• 信号通路关联研究：

• 通过 Co-IP（共免疫沉淀）验证 CLDN1 与胞内信号分子（如 β-catenin、MAPK）的相互作用，探索其在细胞增殖或凋亡中的调控机制（如 CLDN1 缺失可能通过激活 β-catenin 信号促进细胞异常增殖）。

2. 疾病机制研究

• 屏障功能异常相关疾病：

• 皮肤病：如特应性皮炎、银屑病中，CLDN1 表达降低导致表皮屏障破坏，Anti-CLDN1 抗体可用于检测皮损组织中 CLDN1 的缺失程度，揭示屏障修复的潜在靶点。

• 肠道疾病：炎症性肠病（IBD）患者肠道黏膜 CLDN1 表达异常，通过 IHC 或 WB 分析其变化，关联肠道通透性增加与炎症的关系。

• 肝病：肝纤维化或肝硬化中，肝窦内皮细胞 CLDN1 表达改变可能影响窦状隙屏障功能，抗体可用于评估屏障损伤程度。

• 肿瘤研究：

• CLDN1 在肿瘤中的作用具有 “双面性”：在肺癌、乳腺癌中可能作为促癌因子（高表达促进细胞侵袭），在结直肠癌中可能作为抑癌因子（低表达与转移相关）。Anti-CLDN1 抗体可通过检测其表达水平，结合临床数据分析与肿瘤分期、预后的关联（如 CLDN1 高表达的乳腺癌患者生存期缩短）。

• 用于验证 CLDN1 作为肿瘤治疗靶点的潜力（如通过上调 CLDN1 恢复肿瘤细胞间连接，抑制转移）。

3. 临床样本分析与诊断

• 结合组织芯片（TMA）和 IHC，在大样本临床组织中分析 CLDN1 表达与患者预后的关系（如 CLDN1 低表达的胃癌患者淋巴结转移风险更高），为预后判断提供标志物。

• 在液体活检中探索可溶性 CLDN1 片段的检测（需配对 ELISA 试剂盒，基于 Anti-CLDN1 抗体开发），作为疾病进展的监测指标。

四、研究意义与注意事项

1. 研究价值

CLDN1 作为紧密连接的核心分子，其异常表达直接关联屏障功能障碍和疾病发生。Anti-CLDN1 抗体的应用帮助揭示：

• 皮肤病、肠道疾病中屏障破坏的分子机制，为屏障修复药物（如促进 CLDN1 表达的制剂）开发提供依据；

• 肿瘤转移中细胞间连接解体的关键环节，为靶向 CLDN1 的抗肿瘤转移治疗提供理论支持。

2. 注意事项

• Claudin 家族交叉反应：因 CLDN1 与其他 Claudin（如 CLDN3）的序列同源性较高，需选择经特异性验证的抗体（如说明书明确标注无交叉反应），必要时通过敲除实验进一步验证。

• 样本处理影响：CLDN1 为跨膜蛋白，提取细胞总蛋白时需使用含去污剂（如 RIPA 缓冲液）的裂解液，确保膜蛋白充分溶解；组织样本需避免过度固定（如甲醛固定时间过长可能破坏抗原表位），影响 IHC 信号。

• 表达的组织特异性：CLDN1 在不同组织中的表达水平差异较大（如皮肤、肝脏高表达，某些内皮细胞低表达），实验中需设置合适的阳性对照（如正常皮肤组织）和阴性对照（如 CLDN1 敲除样本）。

总之，Anti-CLDN1 抗体是解析紧密连接功能、屏障相关疾病及肿瘤机制的关键工具，其精准应用为基础研究和临床转化提供了重要支撑。